3M測試片包括菌落總數、大腸菌群、大腸菌群/大腸桿菌、金黃色葡萄球菌霉菌和酵母菌、環境李斯特等很多種類。
1.3M測試片的操作方法:
?、傥撮_封時,置于≤8℃冷藏,注意外包裝上的保存期限,打開包裝時,應在室溫條件下。已開封的,應用壓條或膠帶封口后,置于室溫,一個月內用完。
?、诜Q取樣品置于無菌均質袋或均質杯中,加入無菌稀釋液攪拌或均質樣品,并用稀鹽酸或稀氫氧化鈉調pH至6.5~7.2。
注意:無菌稀釋液不可使用含有檸檬酸鹽、酸性亞硫酸鹽或硫代硫酸鹽的緩沖液,這些稀釋液會抑制細菌的生長。
?、蹖y試片置于平坦表面處,保持水平,揭開上層膜,移液器或滴管吸1ml樣液垂直滴加在測試片的正中央。然后將上層膜慢慢落下,盡量不要出現氣泡,切勿向下滾動上層膜。
?、軐喊宓膱A形內凹面朝下,放置在上層膜的正中央,然后輕輕壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養基面積上,切不可扭轉壓板。
?、菽闷饓喊?,靜置1min以上等待培養基凝固。然后測試片的透明面朝上,較多可疊放20片,置于36℃培養48小時,并保持培養箱的濕度。
2.3M測試片的判讀方法:
?、倬淇倲禍y試片內,含有一種紅色指示染劑,可以使菌落呈現紅色便于計數,計算所有紅色菌落,不論大小及顏色深淺。
?、跍y試片菌落計數的適宜計數范圍是25~250。
?、蹨y試片的計數面積約為20cm2。每一個黃色方框的面積是1cm2。當菌落總數超過250個時,為了估計菌落數,可以選擇其中一個或幾個有代表性的小方框(1cm2)。計算平均菌落數,然后再乘以20可得到測試片上的菌落數。
?、墚敎y試片上的菌落太多而無法進行計數時,記錄為“TNTC”。
?、萦泻芨邤盗康木?,使整個生長區域變成粉色,或僅僅在生長邊緣區域觀察到單個菌落,記錄為“TNTC”。
?、抻泻芨叩木鋽盗?,并且有時菌落會出現分布不均勻的情況,記錄為“TNTC”。
?、呖梢钥吹街睆捷^大的菌落,并且可以計數,但是仔細觀察時,會發現非常密集非常細小的菌落分布在計數區域內,此時記錄為“TNTC”。
?、嗪苌贁盗康木N,會將測試片上的培養基液化,在計數區域內出現一個粉紅色的液化區,此時不要記錄液化區內的紅點,應選擇沒有被液化區域內的菌落進行計數,選取沒有液化部分的幾個有代表性的小方格(1cm2)。計算平均菌落數,然后乘以20。得到結果。
?、嶙⒁夂蜆悠窔堅w粒進行區。有些樣品中會含有一些紅色的殘渣顆粒,菌落應該是紅色規則的圓形,而顆粒的形狀是不規則的。如果樣品以紅色顆粒為主(比如辣椒粉),這類樣品的菌落總數檢測,不宜采用3M菌落總數測試片。